DOI: 10.1016/j.colsurfb.2021.111886

引导性骨再生（GBR）广泛应用于治疗口腔骨缺损。然而，由于缺乏有效的屏障膜，成骨作用受到了限制。在这项研究中，通过溶剂浇铸和静电纺丝制备了一种新型双层膜。由聚乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA）制成的屏障层光滑致密，而由微纳米生物活性玻璃（MNBG）和PLGA组成的成骨层粗糙且多孔。矿化评估证实，在模拟体液中的膜上形成了磷灰石。浸泡在磷酸盐缓冲盐水中导致膜随着pH值的适当变化而降解。力学性能试验表明，双层膜在干湿条件下均具有稳定的力学性能。该双层膜具有良好的组织相容性，MNBG/PLGA层可增强骨再生活性。细胞培养结果、成骨基因的表达以及RUNX相关转录因子2和骨桥蛋白的免疫荧光染色证实了这一点。综上，该双层膜有望成为GBR手术的一种很有前途的临床策略。

图1.双层膜的两步制备法。

图2.不同MNBG/PLGA膜的表面。（A）外观和能谱分析。（B）双层膜的横截面。（C）松散层的平均孔径（n=50）。（D）松散层的平均纤维尺寸（n=50）。

图3.不同MNBG/PLGA膜的表面分析（n=3）。（A）表面粗糙度的可视化。（B）不同表面的Sa（平均平面的算术平均高度偏差）和Sz（最大高度）值。（C）不同表面的水接触角。

图4.不同MNBG/PLGA膜的体外矿化和降解性能（n=3）。在SBF中浸泡（A）7天和（B）14天后不同表面结晶的SEM图像。在SBF中浸泡（C）7天和（D）14天后，不同表面结晶的XRD结果。在SBF中浸泡1、3和7天后，不同MNBG/PLGA膜的（E）Ca、（F）P和（G）Si离子释放。（H）在PBS中浸泡28天后不同MNBG/PLGA膜的pH值和（I）剩余重量。

图5.不同（A）干MNBG/PLGA和（B）湿MNBG/PLGA膜的力学表征（代表性应力-应变曲线、拉伸强度、杨氏模量和断裂伸长率）。（n=4）

图6.细胞渗透分析（n=3）。（A）1天和3天后，对照24孔板以及有无经7天降解的致密PLGA的共聚焦扫描。比例尺为200μm。（B）3天后在致密PLGA表面培养的L929s的共聚焦图像和3D重建。比例尺为100μm。

图7.人BMSCs在松散层上的粘附和增殖（n=3）。（A）6和12h的BSA吸附。（B）通过细胞计数法研究6h的hBMSCs粘附率。（C）通过CCK8分析第1、3和5天的hBMSCs增殖。（D）培养12和24h后的hBMSCs形态。比例尺为100μm。（E）培养1、3和5天的hBMSCs的活/死染色。比例尺为200μm。

图8.人BMSCs体外成骨分析。第7天和第14天的ALP活性（n=5）（A）和染色（n=5）（B）。（C）在不同松散层上培养7天和14天的hBMSCs中OCN、RUNX2、OPN和ALP的相对mRNA表达（n=5）。（D）在松散层上培养14天的hBMSCs的RUNX2免疫荧光染色（n=3）。（E）在松散层上培养21天的hBMSCs的OPN免疫荧光染色（n=3）。比例尺为200μm。