DOI: 10.1016/j.talanta.2021.122438

UPLC-MS/MS方法是常规、高通量测定生物单胺以诊断分泌儿茶酚胺的肿瘤的金标准。但是，如果不采用有效的样品预处理方法就无法实现这一目标。因此，本研究开发了薄膜固相微萃取（TF-SPME）和填充纤维固相萃取（PFSPE）两种预处理方法，并对其分析尿液中生物单胺及其代谢产物的性能进行了评估。选择亲水亲脂平衡（HLB）涂层作为薄膜叶片式SPME方法的吸附剂，并与聚氯醚（PCE）复合纳米纤维作为PFSPE方法的吸附剂进行了比较。在最佳条件下，新开发的TF-SPME方法的绝对提取回收率和相对基质效应分别为35.7-74.8％和0.47-3.63％。去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、去甲变肾上腺素3-甲氧酪胺、血清素、组胺的线性范围为0.25-500ng/mL，而变肾上腺素的线性范围为0.1-500ng/mL。TF-SPME的批内和批间变异系数为0.7-8.7％，对应的准确度经计算为90.8-104.7％和89.5-104.5％。与PFSPE方法相比，TF-SPME方法对8种目标物质具有更高的提取效率、更低的基质效应和更宽的线性范围，从而确保了同时检测所有目标化合物的更高准确性。因此，本研究所提出的TF-SPME方法可通过一次同时定量尿液中的8种生物单胺类，以实现对常规临床背景和其他相关研究中的神经内分泌肿瘤的高通量筛查。

图1.（A）HLB TF-SPME涂层（5μm颗粒）的SEM图像，使用2000x的放大倍率；（B）HLB-WAX TF-SPME涂层（5μm颗粒）的SEM图像，使用12570x的放大倍率；（C）WCX-oasis TF-SPME涂层的SEM图像，使用2550x的放大倍率；（D）PCE TF-SPME涂层的SEM图像，使用13350x的放大倍率；（E）PS/PCE复合纳米纤维的SEM图像，使用3960x的放大倍率；（F）PS/PCE复合纳米纤维的SEM图像，使用15940x的放大倍率。

图2.萃取相的选择：（A）当存在络合剂时，对萃取生物单胺的萃取相进行评估以及（B）当不存在络合剂时使用HLB萃取生物单胺。

图3.比较解吸到四种测试溶剂混合物中的生物单胺数量。使用HLB涂层对生物单胺浓度为100ng/mL的1000μL PBS进行萃取，持续60分钟。将叶片解吸到200μL溶剂中。

图4.目标生物单胺的提取时间（A）和解吸时间（B）图。用加有50ng/mL MN、5-HT、NMN、E、DA、NE、3-MT和组胺的PBS稀释的空白尿液进行萃取。

图5.测定目标生物单胺的洗涤时间优化。从掺有20ng/mL IS的真实尿液中提取。

图6.DPBA量对提取目标生物单胺的影响。

图7.使用PFSPE和TF-SPME-HLB的相同尿液样品的结果比较。