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浙江大学计剑&傅国胜Bio-des. Manuf.:具有不对称NO释放功能的电纺丝纤维膜可差异性调节细胞生长
2021/6/29 10:56:04 易丝帮

DOI: 10.1007/s42242-021-00131-w

 

心血管疾病的高发病率导致临床应用对合成血管移植物的大量需求。通常将抗增殖药物负载到装置中,以在植入后达到理想的抗血栓形成效果。然而,这些常规药物的非选择性会导致血管重建失败,长期而言可能会导致潜在的并发症。为了解决这个问题,本研究通过静电纺丝技术构建了一种不对称膜。正如所预期的那样,仅从双层膜的一侧负载并有效释放一氧化氮(NO)。由于NO的扩散距离短,其对膜另一侧的影响可忽略不计,因此可以对两侧不同的细胞进行选择性调节。释放的NO促进了内皮细胞(ECs)的生长,超过了平滑肌细胞(SMCs),而在NO缺失的一侧,SMCs生长成多层。总体结构类似于天然血管,成片的ECs作为内层,多层SMCs对其起到支撑的作用。另外,该膜保留了ECs的正常功能,同时没有加剧炎症反应。本研究通过制备这种可以差异调节细胞行为的材料类型,为电纺丝膜在心血管领域(例如人造血管)的应用提供了一种新的见解。

 

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图1.实验方案设计。a.通过静电纺丝技术制备双层电纺膜;b.当在双层膜的两侧共培养HUVECs和HUVSMCs时,细胞在PLLA一侧正常生长;而在PLLA+SNAP一侧,HUVSMCs的生长明显受到抑制。但是,HUVECs仍然正常生长


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图2.电纺纤维膜的表征。a.静电纺丝纤维膜的SEM图像;b.纳米纤维的平均直径;c.根据EDS中硫元素分析的平均像素面积;d.SNAP负载静电纺丝纤维膜的NO释放特性


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图3.电纺丝纤维膜对HUVEC和HUVSMC增殖的影响。静电纺丝膜对HUVSMC不同作用的免疫荧光图像(a)和统计图(b),c.HUVSMC在不同膜上的细胞活性。静电纺丝膜对HUVEC不同作用的免疫荧光图像(d)和统计图(e),f)HUVEC在不同膜上的细胞活性。HUVEC和HUVSMC共培养的免疫荧光图像(g)和统计图(h)(红色:HUVEC;绿色:HUVSMC;蓝色:核)


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图4.静电纺丝纤维膜对HUVEC和HUVSMC功能的影响。a.在不同静电纺丝膜上,HUVSMC的cGMP浓度;b.HUVEC在不同静电纺丝膜上的NO释放量(左:空白膜上的HUVEC,右:SNAP负载膜上的HUVEC);c.不同电纺丝膜上内皮细胞粘附分子和有害因子的相对mRNA表达


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图5.双层电纺丝纤维膜对HUVEC和HUVSMC共培养的影响。a.Millieell小室实验设置方案:将HUVSMCs接种到Millieell小室中,将小室放入细胞培养板中,分离细胞和膜,但NO和培养基可以穿过膜的两侧。不同电纺丝膜上HUVSMC的光学显微镜图像(b)和统计图(c)。HUVEC和HUVSMC在双层电纺丝膜不同侧的免疫荧光图像(d)和统计图(e)(红色:HUVEC,绿色:HUVSMC)


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