DOI:10.1016/j.foodchem.2020.128144

通过碱水解由静电纺丝工艺制备的聚丙烯腈纳米纤维膜合成了弱离子交换膜（P-COOH）。对P-COOH膜的物理性能进行了表征，并研究了其在蛋清溶菌酶纯化中的应用。评估了P-COOH膜在搅拌式超滤装置（Millipore，型号8010）中的溶菌酶吸附效率。研究了进料浓度、转速、进料流量和工作压力等关键参数的影响。结果表明，只需一步即可成功纯化溶菌酶，回收率高达98％，纯化因子为63。分别使用8050和8200型搅拌式超滤装置，将纯化策略分别扩大至32.7和70mL的更高原料负载量。扩大过程获得了相似的纯化结果，证明了所采用的纯化技术的线性可扩展性。

图1.配备有P-COOH膜片的搅拌槽，用于纯化CEW中的溶菌酶，对膜结构和搅拌槽的详细配置进行近距离观察。

图2.碱处理（A）10分钟和（B）30分钟，其NaOH浓度和操作温度对P-COOH膜吸附TBO的影响。

图3.CEW溶液的pH对P-COOH膜吸附溶菌酶的影响。给出了相对值，将结果与pH5时的总蛋白（195.91 mg/g），pH5时的溶菌酶活性（7.26×107 U/mL）和pH9时的比活性（5.82×105 U/mg）进行了比较。

图4.在搅拌槽（Millipore 8010型）中，（A）当旋转速度为0 rpm，初始液体流速为20 mL/min，初始压力为0 psi时，CEW溶液稀释系数对纯化CEW溶液中溶菌酶的影响。（B）当稀释系数为10，初始液体流速为20 mL/min，初始压力为0 psi时，CEW溶液转速对纯化CEW溶液中溶菌酶的影响。（C）当稀释系数为10，旋转速度为200 rpm，初始压力为0 psi时，CEW溶液初始液体流速对纯化CEW溶液中溶菌酶的影响。以及（D）当稀释系数为10，旋转速度为200 rpm，初始液体流速为20 mL/min时，CEW溶液初始工作压力对纯化CEW溶液中溶菌酶的影响。

图5.（A）使用不同浓度的NaCl溶液逐步洗脱吸附的溶菌酶，（B）使用（a）8010至（b）8500型和（c）8200型纯化系统的性能，（C）使用8010型纯化系统的性能，其中（a）为P-COOH膜和（d）为Sartobind C膜。以及（D）分子量标记物（通道M），CEW样品（通道1），通过试样的流体（通道2），洗涤样品（通道3），洗脱液（通道4）和Sigma-Aldrich商用溶菌酶标准品（通道5）的SDS-PAGE分析。使用8200型搅拌式超滤装置纯化溶菌酶后获得的样品。