DOI:10.1080/17458080.2020.1788216

丝素蛋白是一种被广泛研究用于生物医学领域的蛋白质。在本研究中，将蚕丝溶解在CaCl2-C2H5OH-H2O中以获得丝素蛋白（SF）溶液，然后在冷冻干燥机中冻干。对SF海绵的静电纺丝是在不同的丝素浓度下进行的。通过EDC和NHS，将PAMAM树枝状聚合物交联到羧基封端的丝素蛋白上来修饰SF纳米纤维。使用SEM、X射线衍射、FTIR和MTT分析对修饰的SF纳米纤维支架进行了评估。SEM显微照片显示，含有7％（w/w）丝素蛋白的静电纺纤维具有连续的纤维，平均直径为80 nm。经过处理，SF纳米纤维从无规卷曲至b-片的构象转变迅速发生，通过FTIR和X射线衍射证实了这一点。FTIR光谱显示酰胺峰，这证实了丝素蛋白的存在。修饰分析结果表明，SF纳米纤维支架表面的氨基较多。通过将成纤维细胞L929接种在纳米纤维上进行生物相容性测试。采用MTT法检测成纤维细胞的粘附和增殖，未见细胞毒性。因此，丝素蛋白纳米纤维支架在组织工程中具有广阔的应用前景。

图1.不同浓度的SF纳米纤维的形态：a.5％；b.7％；c.9％；d.11％；e.13％；f.15％。

图2.通过EDC-NHS使SF与PAMAM G2交联的机理示意图。

图3.SF纳米纤维处理后拍摄的SEM图像：（a）EDC=5，NHS=2.5，（b）EDC=4，NHS=2，（c）EDC=3，NHS=1.5，（d）EDC=2，NHS=1，（e）EDC=1，NHS=0.5。

图4.针对L-929细胞的MTT分析和细胞毒性研究：（a）孵育24小时期间的细胞存活率（％），（b）与对照材料孵育后的光学显微镜图像，（c）与SF纳米纤维支架孵育后的光学显微镜图像。

图5.FTIR透射光谱：（A）脱胶的丝素蛋白，（B）由PAMAM树枝状聚合物修饰的丝素蛋白纳米纤维支架。

图6.丝素蛋白的X射线衍射图。（A）纯丝素蛋白。（B）用树枝状聚合物处理的丝素蛋白。