DOI:10.1016/j.ijbiomac.2020.06.181

与天然细胞外基质（ECM）的结构和组成相似性是组织再生理想支架的一个主要特征。为了获得类似于皮肤ECM的纤维/凝胶结构，使用与ECM具有结构相似性和伤口愈合特性的生物聚合物，即壳聚糖（CS）、明胶（Gel）和透明质酸（HA），制备了多组分支架。通过双重静电纺丝技术将CS-Gel和CS-HA纳米纤维同时电纺到收集器上。衰减全反射傅立叶变换红外光谱（ATR-FTIR）光谱和热重分析（TGA）证实了聚合物的存在、可能的相互作用以及聚电解质配合物的形成。当支架暴露于水性介质时，CS-HA纤维的非复合组分形成凝胶状态，而CS-Gel纤维保留其纤维状结构，从而形成了纤维/凝胶结构。与CS（90％）和CS-Gel（96％）支架相比，CS-Gel/CS-HA支架在最初24小时内显示出明显更高的细胞增殖率（109％）。另外，HA的加入改善了初始细胞粘附。大鼠体内伤口愈合结果表明，CS-Gel/CS-HA支架具有更强的促伤口愈合能力，在该支架中形成了与正常皮肤最相似的新组织。

图1.CS、CS-Gel和CS-Gel/HA支架在水蒸气处理之前、水蒸气处理之后以及将处理后的支架浸入PBS（pH7.4）2小时后的SEM显微照片。插图代表纤维直径分布。

图2.（A）CS-Gel和（B）CS-HA荧光显微镜图像，以及（C）CS-Gel/CS-HA纳米纤维的合并图像。比例尺代表100μm。

图3.（A）未经处理的CS、水蒸气处理的CS、水蒸气处理的CS-Gel和水蒸气处理的CS-Gel/HA支架的FTIR、（B）TGA和（C）DTG。

图4.（A）支架的典型应力-应变曲线，（B）支架的相应机械性能，（C）支架在PBS（pH7.4）中的膨胀度和（D）重量损失。

图5.（A）支架的静态水接触角投影和（B）支架的接触角值。

图6.NHDF细胞在支架上的增殖和粘附。（A）使用MTT测定在支架（CS、CS-Gel和CS-Gel/HA）上培养1、3和4天后细胞的存活率（*表示显著性差异，P≤0.05）。（B-D）在（A）CS、（B）CS-Gel和（C）CS-Gel/HA支架上培养8小时后细胞的SEM图像。（a-f）在（a，d）CS、（b，c）CS-Gel和（e，f）CS-Gel-HA支架上培养8小时后，活死染色的NHDF细胞的荧光显微镜图像。绿色和红色分别代表活细胞和死细胞。（要解释该图例中对颜色的引用，请参阅本文的网络版本。）

图7.（A）伤口愈合过程的代表性宏观图像，以及（B）在所示时间点用CS、CS-Gel和CS-Gel/HA支架处理后的治疗动物的伤口面积（伤口收缩）。*表示与对照组比较存在显著性差异（P＜0.05），＃表示与CS-Gel组比较存在显著性差异（P＜0.05）。

图8.对照组以及在第3、7和14天用CS、CS-Gel和CS-Gel/HA支架处理的组中受伤组织的苏木精和曙红（H＆E）染色图像。黑色三角表示炎症，黄色三角表示出血（充血），黑色箭头表示纤维增生，虚线箭头表示新生血管形成，星形箭头表示胶原纤维，绿色三角表示上皮形成，黄色箭头表示皮肤附件元素，例如毛发和皮脂腺。（要解释该图例中对颜色的引用，请参阅本文的网络版本。）

图9.对照组以及在第3、7和14天用CS、CS-Gel和CS-Gel/HA支架处理的组中受伤组织的蓝色Masson三色染色图像。黑色三角显示炎症，黄色箭头表示出血（充血），黑色箭头表示纤维增生，虚线箭头表示新生血管形成，星形表示胶原纤维，绿色三角表示上皮形成，黄色箭头表示皮肤附件元素，例如毛发和皮脂腺。（要解释该图例中对颜色的引用，请参阅本文的网络版本。）