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Tissue Eng.:PHBV改性的PLLA电纺纤维膜的形状记忆和成骨能力
2020/6/20 11:52:51 易丝帮

DOI: 10.1089/ten.TEA.2020.0086

左旋聚乳酸(PLLA)作为最著名的可生物降解性聚酯之一,在骨组织工程领域得到了广泛的研究。如果程序设计得当,PLLA支架也可以被赋予形状记忆功能。然而,一些值得注意的问题,例如机械脆性、高玻璃化转变温度Tg以及相对较差的形状保持和恢复性能,这就需要对PLLA进行改性以改善其在生理条件下的应用效果。本研究旨在通过静电纺丝法,结合可生物降解的聚(3-羟基丁酸酯-共-3-羟基戊酸酯)(PHBV)形成超细复合纤维(即PLLA-PHBV),从而对PLLA进行改性。不同质量比(10:0、9:1、8:2、7:3、6:4和0:10)的PLLA-PHBV可以成功地电纺成细度为2-3μm的纤维。PHBV的加入使PLLA-PHBV共混物的Tg降低,杨氏模量增加,同时PHBV的质量比逐渐增加到30%。与未改性的PLLA纤维相比,PLLA-PHBV(7:3)配方具有优异的形状记忆性能,表现为较高的形状固定率(>98%)和形状恢复率(>96%)。此外,即使在非成骨诱导条件下,PLLA-PHBV(7:3)纤维在小鼠骨间充质干细胞中也显示出增强的成骨诱导能力。总体而言,这项研究首次证明了电纺PLLA-PHBV复合纤维增强的形状记忆和成骨能力,并且所研究的PLLA-PHBV(7:3)纤维体系有望作为一种多功能支架材料应用于骨组织修复和再生。

 

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图1:电纺PLLA-PHBV纤维膜的形态和结构特征。A.SEM图像,比例尺=10µm,B.直径测量,C.FTIR光谱,D.X射线衍射图。


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图2:电纺PLLA-PHBV纤维膜的热性能和拉伸性能。A.DSC曲线,B.由A得出的Tg值,C.37℃时的典型拉伸应力-应变曲线,D.由C得出相应的杨氏模量。


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图3:电纺PLLA-PHBV纤维膜的形状记忆效应。A.对PLLA-PHBV(7:3)和PLLA纤维膜的形状记忆测试重复7次。B.通过将暂时的直线状(上图)或压缩弹簧状(下图)浸入温水(42℃)中几秒钟来宏观展示形状记忆能力,从而恢复最初的螺旋状形状。


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图4:在PLLA和PLLA-PHBV电纺纤维支架上培养长达6天的BMSC的增殖和形态观察(7:3)。(A-B)在不同的培养时间和接种密度下,通过CCK-8测定的BMSC增殖直方图(n=6)。(C-D)BMSC扩散的SEM显微照片和直方图(n=3),E.BMSC的荧光染色。用鬼笔环肽和DAPI分别染色F-肌动蛋白丝(绿色)和细胞核(蓝色)(n=3)(**p<0.01)。


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图5:在骨诱导和非骨诱导条件下,在不同支架/基底上培养14天的BMSC的成骨表达。A.ALP染色的代表性图像。B.ALP活性的定量(n=3)。C.ARS染色的代表性图像。D.钙产量的量化(n=3)。E.骨特异性基因编码Runx2、Alp、ColI和Ocn(n=3)的qRT-PCR分析。(F-G)ColI和OPN蛋白在不同组(n=3)中的代表性免疫荧光图像,其中ColI和OPN用绿色荧光标记,而细胞核则用蓝色荧光染色。NM:正常生长培养基;OM:骨诱导介质(*p<0.05,**p<0.01)。


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