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Mater. Des.:基于软骨衍生的细胞外基质cECM/PCL杂化纳米纤维支架的制备及其在软骨组织中的应用
2020/5/8 9:59:42 易丝帮

DOI:10.1016/j.matdes.2020.108773

衍生自脱细胞组织和器官的细胞外基质(ECM)已在各种临床前和临床应用中用作生物支架。但是,缺乏机械性能和形状可控性是一个缺点。相比之下,合成聚合物可以很容易地设计出具有良好机械性能的支架,但它们的生物功能有限。在这项工作中,研究者探索了一种合成电纺软骨细胞外基质(cECM)和聚己内酯(PCL)复合纳米纤维膜的新方法。软骨是一种致密的组织,难以进行静电纺丝。为了克服这个问题,将软骨切成薄片,磨成粉末,然后分解成较松散的结构。与电纺PCL相比,cECM/PCL(质量比50:50)杂化纳米纤维表面光滑,薄且均匀,具有增强的机械性能和润湿性。同时,cECM/PCL纳米纤维膜中cECM的存在显著促进了体外软骨细胞的增殖,有利于体内软骨的再生。以上结果表明,具有良好机械性能和生物相容性的cECM/PCL纳米纤维膜有望成为软骨再生的支架材料。此外,这项工作为合成用于其他组织的ECM基杂化纳米纤维支架提供一种方便且经济的方法。

 

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图1.软骨衍生的细胞外基质的制备示意图。


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图2.cECM/PCL杂化纳米纤维膜的制备过程示意图。


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图3.去细胞前后软骨片的整体图(A)和组织学染色(B)。去细胞软骨粉和软骨衍生的细胞外基质的整体视图(C)和SEM(D)图像。比例尺:200μm。


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图4.电纺cECM、cECM/PCL(70:30)、cECM/PCL(50:50)和PCL纳米纤维膜的SEM图像。比例尺:2μm。


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图5.cECM、cECM/PCL(50:50)和PCL纳米纤维膜的化学和热学特性,(A)ATR-FTIR分析、(B)XRD图谱和(C)TGA曲线。


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图6.电纺PCL和cECM/PCL(50:50)膜的亲水性和机械性能:(A)水接触角、(B)典型应力-应变曲线、(C)拉伸强度、(D)杨氏模量和(E)断裂应变。数据表示为平均值±SD,每组n=10,*P<0.05。


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图7.细胞活力测定、形态学和在支架上的增殖。(A)活/死染色;(B)肌动蛋白和细胞核染色;(C)细胞增殖。比例尺:200μm。


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图8.细胞支架构建体的整体视图和体内工程化组织的定量分析。(A)圆形ECM/PCL(50:50)膜的整体视图;(B)软骨细胞的形态;(C)膜上软骨细胞的形态;(D)细胞支架构建体;(E)构建体的整体视图;(F)植入裸鼠的构建体。(G,H和I)在不同时间点的工程化软骨的整体视图、(J)湿重和(K)杨氏模量。比例尺:100μm。数据表示为平均值±SD,每组n=6,*P<0.05。


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图9.在不同时间点对工程化软骨的组织学分析。黄色虚线之间的区域表示未降解的cECM/PCL(50:50)膜。比例尺:50μm。


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