DOI:10.1016/j.ifset.2020.102370

将漆酶固定在比表面积为17.05 m2/g的电纺壳聚糖/聚乙烯醇纤维（ceCPL）上，以增强酶型时间-温度指示器（TTI）的稳定性。ceCPL在4℃至40℃的温度下表现出较高的相对活性，对于80μg/cm2的ceCPL固定化漆酶，愈创木酚的显色活化能（Ea）接近40.9±2.8 kJ/mol。在ceCPL动态温度响应实验中，使用4℃至25℃的间歇温度变化，未发生不可逆失活，这表明ceCPL对温度变化具有理想的耐受性和敏感性。当分别将80或8μg/cm2的漆酶固定在ceCPL上时，需要大约1或38天才能在4℃达到显色终点。利用动力学模型分析得出的回归方程，可以根据ceCPL显色的颜色变化将其进一步用于设计合适的时间-温度指示器（TTI）以监测食品质量。

图1.（a）CS/PVA溶液的浓度与粘度之间的关系，（b）ceCPL的扫描电子显微镜图像（图像的放大倍数为5000倍，插图为30,000倍），（c1）、（c2）分别是50µg/cm2 ceCPL固定化漆酶浸入愈创木酚溶液之前和之后的示意图。

图2.玉米蛋白膜在不同固定步骤下的FTIR光谱：（a）PP、（b）CS/PVA/PP、（c）CS/PVA/PP/GA和（d）CS/PVA/PP/GA/Lacc。

图3.（a）ceCPL显色的ΔE和OD470之间的关系；（b）在37℃等温储存过程中ceCPL在不同量的固定化漆酶中的反应；（c）相对于50µg/cm2 ceCPL固定化漆酶的温度和时间，标准品（Abs）的反应曲面图。

图4.储存在4℃陈列柜中的ceCPL（8-80µg/cm2）的颜色变化。

图5.在动态温度条件下储存的ceCPL（25μg/cm2）的吸光度变化；在5℃和25℃下各2次循环，每次2小时。