DOI: 10.1002/app.49223

本工作报告了一项用于组织再生的纳米纤维生物相容性聚乳酸-聚己内酯(PLA-PCL)支架的初步生物学研究。其目的是评估基质表面形貌对细胞粘附和增殖的影响。通过配备有平面或旋转心轴收集器的静电纺丝设备制备了支架，并对其表面形貌和纳米纤维尺寸进行表征。考虑到它们的分化能力，以小鼠胚胎成纤维细胞系（NIH-3T3）为皮肤模型，小鼠神经母细胞瘤neuro-2α细胞系为神经组织模型与小鼠间充质干细胞（MSCs）进行细胞培养研究。采用扫描电子显微镜和激光扫描共聚焦显微镜成像分析以及细胞存活率（MTT，L 3-（4,5-二甲基噻唑-2-y）-2,5二苯基四氮唑溴盐）测试对固定时间点的细胞培养图像进行分析。结果表明，电纺纳米纤维支持受试细胞系的生长和增殖，但是由旋转心轴获得的电纺基质显示出明显更高的细胞活力且遵循了电纺纳米纤维的取向。

图1.通过以下方式获得的电纺纳米纤维基质的扫描电子显微镜图像：（a）平板收集器18G针，（b）旋转心轴收集器18G针，（c）平板收集器25G针和（d）旋转心轴收集器25G针

图2.平板收集器18G针：（a）二值图像分割，（b）频率直方图。旋转心轴收集器18G针，（c）二值图像分割，（d）频率直方图。平板收集器聚丙交酯-聚己内酯（PLA-PCL）25G针，（e）二值图像分割，（f）频率直方图。旋转心轴收集器25G针，（g）二值图像分割，（h）频率直方图[颜色图可在wileyonlinelibrary.com上查看]

图3.通过以下方式获得的定向分析（OrientationJ）图像：（a）平板收集器18G针，（c）旋转心轴收集器18G针，（e）平板收集器25G针，（g）旋转心轴收集器25G针。由（b）平板收集器18G针、（d）旋转心轴收集器18G针、（f）板收集器25G针和（h）旋转心轴收集器25G针获得的取向迹线[颜色图可在wileyonlinelibrary.com上查看]

图4.在电纺纳米纤维基质上进行MTT，3-（4,5-二甲基噻唑-2-y）-2,5-二苯基四氮唑溴盐测试的结果，该基质与以下物质一起孵育：（a）NIH-3T3细胞，（b）Neuro-2α细胞，（c）小鼠间充质干细胞（mMSC）。P，平板收集器；M，旋转心轴收集器；25G和18G：内针直径

图5.在电纺基质上孵育3天后的NIH-3T3：图（a）通过固定方案获得的样品的扫描电子显微镜（SEM）图像；图（b）通过共聚焦显微镜进行染色测定的结果[颜色图可在wileyonlinelibrary.com上查看]

图6.在电纺基质上孵育6天后的NIH-3T3：图（a）通过电子扫描显微镜（SEM）拍摄的由固定方案获得的样品的显微照片；图（b）通过共聚焦显微镜获得的染色测定结果[颜色图可在wileyonlinelibrary.com上查看]

图7.神经2α与电纺纳米纤维孵育的结果：图（a）孵育3天后进行死活分析；图（b）孵育6天后通过固定方案获得的样品的扫描电子显微镜（SEM）图像；图（c）孵育6天后的染色测定结果。图（d）孵育9天后通过固定方案获得的样品的显微照片[颜色图可在wileyonlinelibrary.com上查看]

图8.在电纺纳米纤维上孵育的小鼠间充质干细胞（mMSC）的结果：图（a）孵育3天后进行死活分析；图（b）孵育6天后通过固定方案获得的样品的显微照片；图（c）孵育6天后的染色测定；图（d）孵育9天后通过固定方案获得的样品的显微照片；图（e）孵育9天后的染色测定结果[颜色图可在wileyonlinelibrary.com上查看]