DOI: 10.1002/jbm.b.34394

椎板切除术后通常会发生硬脊膜和周围纤维组织之间的硬膜外粘连，从而导致如神经压迫、剧烈疼痛等临床症状。在这项研究中，作者报告了载药双层电纺纳米纤维膜，以防止硬膜外粘连的发生。两层纳米纤维均由聚己内酯（PCL）和壳聚糖（CS）的混合物制成，但重量比不同。接触硬脊膜的底层装有美洛昔康（MX），以防止炎症。与纤维组织接触的顶层掺有丝裂霉素C（MMC），以抑制DNA和胶原蛋白的合成。两种药物在约12天内从双层膜中释放出来。同时，该膜可以在体外抑制成纤维细胞增殖，而没有细胞毒性。在兔椎板切除术模型中，基于粘附评分、组织学和生化评估，双层膜可有效防止硬膜外粘附形成。相对于膜仅负载一种药物的情况，MX和MMC的组合释放可以降低炎症反应和I/III胶原蛋白的表达。这种方法为构建双重药物输送系统提供了新的进展，并为抑制椎板切除术后硬膜外黏附提供了创新性的屏障策略。

图1兔椎板切除术的过程：（A）可见脊髓硬脑膜的椎板缺损（如箭头所示），（B）椎板缺损上的电纺膜（显示黑框）

图2具有不同放大倍数的横截面形态（A，B）和双层膜的表面形态（C，D）的电纺PCL-CS膜的SEM显微照片。PCL-CS膜（E到H）的外层（PCL：CS = 8：2）和内层（PCL：CS = 6：4）的直径和孔径分布。CS，壳聚糖；PCL，聚己内酯；SEM，扫描电子显微镜

图3聚己内酯-明胶膜的化学、热和机械性能：（A）FTIR光谱，（B）DSC热分析图和（C）应力-应变曲线。DSC，差示扫描量热法；FTIR，傅立叶红外

图4 37℃在PBS中孵育后，MMC/MX从PCL-CS电纺膜的每日（A）和累积（B）释放。CS，壳聚糖；MMC，丝裂霉素-C；MX，美洛昔康；PBS，磷酸盐缓冲盐水；PCL，聚己内酯

图5显微照片：（A）PCL/CS膜中屏障功能的照片和示意图。（B）将成纤维细胞接种到PCL/CS膜后的24孔板底部；（C）接种细胞的PCL/CS膜对面的SEM显微照片。CS，壳聚糖；PCL，聚己内酯；SEM，扫描电子显微镜

图6电纺膜提取液中的细胞相对生长率（A）和使用AO-EB试剂盒对48小时培养的死/活细胞荧光染色图像（B）

图7细胞在各种膜表面的增殖和粘附：（A）成纤维细胞在1、3和5天内的光密度（O.D.）；培养了1天的细胞的SEM显微照片（B）和荧光图像（C）。SEM，扫描电子显微镜

图8植入后第4、8、12周的PCL-CS膜的总体形态（A至C）和膜表面的SEM显微照片（D至F）。黑色箭头指示吸收的边缘，白色箭头指示孔。 CS，壳聚糖； PCL，聚己内酯

图9对照、未负载和MMC/MX负载的膜组中粘附形成（A）和羟脯氨酸含量（B）的总体评估，与MMC/MX组相比*p <0.05，与对照组相比p <0.05。MMC，丝裂霉素-C；MX，美洛昔康

图10不同PCL-CS膜组的组织学评估，在椎板切除术后1个月进行H＆E（A）和Masson（B）染色。右列是框中的放大图片。箭头指示脊柱硬脑膜。SC，脊髓； CS，壳聚糖；PCL，聚己内酯

图11 4周后，不同PCL-CS膜组的粘附组织中胶原蛋白I/III和α-SMA表达的蛋白质印迹法测定。CS，壳聚糖；PCL，聚己内酯