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制备包覆载药微球的丝素蛋白静电纺纤维的方法
2020/6/8 16:13:57 易丝帮

一、背景

  丝素蛋白是一种性能优异的天然蛋白质,具有良好的生物相容性和生物降解性、无毒、无刺激,易于加工成膜、纤维、水凝胶、微球、多孔材料等多种形态,在药物传输领域具有广阔的应用前景;其中,微球以其高的比表面积和表面能、易于扩散、对外界刺激反应快等特点,引起了研究者们的高度关注。

二、实验步骤

1、再生丝素蛋白溶液的制备


      制备丝素脱胶丝,将脱胶丝于 40℃下置于 9.3mol/L 的 LiBr水溶液中溶解 2h,过滤除杂后置于透析袋里(MWCO 为 14000±2000Da)用去离子水连续透析三天,直到透析袋外去离子水的电导率基本不变时,得到 2wt%的丝素蛋白溶液,采用自制的气流浓缩装置,将溶液质量分数调至 3wt%,置于 4℃冰箱中储存备用。

2、姜黄素丝素蛋白微球的制备

  

      将不同浓度的姜黄素乙醇溶液在缓慢搅拌下逐滴加入3wt%的丝素蛋白溶液中,VEtOH/VSF 为 8︰20,所得的混合液于-20℃下冷冻 24h。得到纳米粒子乳液,由于姜黄素在水中的溶解度极低,在制得微球后未包封药物会有部分析出沉降在底部,经低速离心除去析出的姜黄素,高速离心分离上清液后,将得到的载药丝素蛋白微球冷冻干燥后备用。

3、静电纺丝溶液的制备

  

      将透析后的再生丝素蛋白溶液于自行搭建的浓缩装置下进行浓缩,将其浓度调至20wt%左右,然后采用分散有姜黄素载药丝素蛋白微球(微球含量为丝素蛋白质量的1wt%)的 pH 为 6.0 的 Tris-Mes 缓冲体系将溶液 pH 调节至 6.0,将调过 pH 的混合液进一步浓缩,浓度调至 30wt%,然后搅拌一定时间使微球在其中分散均匀。

4 、静电纺丝参数的确定

  

      取浓度为 30wt%,pH 为 6.0 的分散有丝素蛋白微球的丝素蛋白溶液进行静电纺丝,以金属板为接收装置,定性测定最佳纺丝电压、距离。设定电压的变化范围为30~42kV,针尖距金属板距离的变化范围为 13~20cm,溶液注射速度变化范围为13~17µL/min。

5、含有载药微球的纳米纤维膜的制备


  静电纺丝实验于自行搭建的静电纺丝装置上进行,静电纺装置包括微量注射泵、平面铝板和静电发生器三部分。纺丝时,喷丝针头内径 0.51mm,微量注射泵注射速度为0.9mL/h,针头与接收板之间的距离为 15cm,静电电压 35kV。


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